2 tipos de métodos de electroforesis de proteínas séricas (con la figura)

El suero tiene una serie de proteínas. En 1937, Arne W Tiselius introdujo el método de separación de las diferentes proteínas en un campo eléctrico.

En la electroforesis, las proteínas se separan en un campo eléctrico. Posteriormente, se desarrolló la electroforesis zonal en papel o acetato de celulosa. En 1952, se desarrolló un método de dos etapas que combinaba electroforesis con inmunodifusión. Posteriormente, C Williams, P Graber y M Poulik introdujeron el método clásico de inmunoelectroforesis (en el que tanto la electroforesis como la doble inmunodifusión se realizan en el mismo portaobjetos recubierto con agar).

1. Electroforesis de zona:

Las proteínas se pueden separar en función de sus cargas eléctricas superficiales. Para la separación se utiliza un medio de soporte inerte como papel, acetato de celulosa o agar. La muestra de suero se coloca en el medio de soporte. El medio de soporte se conecta entonces a los polos positivo y negativo del aparato de electroforesis. Bajo el campo eléctrico, las proteínas se cargan y se mueven a través del medio de soporte. Su movimiento depende de su carga eléctrica.

Dado que diferentes moléculas de proteína tienen diferentes cargas, se mueven a diferentes posiciones en el medio de soporte. Por lo general, la electroforesis se lleva a cabo durante 60-120 minutos o más. Luego, las proteínas se tiñen y se examinan visualmente o se escanean en un densitómetro. El escaneo del densitómetro de las fracciones de proteína separadas y teñidas convierte cada banda en un patrón en su pico característico y ayuda en la cuantificación de cada fracción de proteína.

2. Electroforesis de proteínas séricas:

El suero humano normal se separa en cinco bandas electroforéticas principales: albúmina, globulina α ₁, globulina α2, globulina β y globulina y (Fig. 27.5).

La electroforesis de zona es útil en el diagnóstico de ciertas enfermedades humanas:

Figs. 27.5A a C:

Electroforesis en tira de acetato de celulosa y escaneo de densitómetro de la tira de papel de acetato de celulosa: A y A1: bandas normales de proteína sérica en tira de acetato celular visualizadas después de la tinción (A) y escaneo de densitómetro de tira de acetato de celulosa (A1).

B y B1: hipergammaglobulinemia

C y C1: hipogammaglobulinemia

yo. Mieloma múltiple y macro globulinemia de Waldenstrom. En estas enfermedades, un pico de proteína restringido electroforéticamente generalmente ocurre en la región de la globulina γ. La espiga representa una acumulación de una inmunoglobulina monoclonal. Las inmunoglobulinas monoclonales tienen una carga superficial definida y, por lo tanto, se produce una espiga (mientras que el patrón normal de las inmunoglobulinas policlonales produce un frotis en la región de la globulina Y).

ii. Hipogammaglobulinemia (disminución marcada en la gammaglobulina sérica).

iii. Hipoproteinemia (reducción marcada en todas las proteínas séricas).

iv. Hipoalbuminemia

Reducción de la albúmina, que se presenta en muchas enfermedades del hígado y riñón.

v. La electroforesis de la orina ayuda en la detección de cadenas ligeras de inmunoglobulina libres, como la proteína Bence-Jones.

vi. La electroforesis de zona del líquido cefalorraquídeo (LCR) ayuda en el diagnóstico de esclerosis múltiple y otros trastornos del sistema nervioso central. La electroforesis de proteínas séricas se considera un ensayo de detección para detectar anomalías de proteínas. Se requiere un análisis adicional para encontrar las anomalías específicas.